溶解氧调控下丝状颗粒污泥的形成及其性能研究
Formation and performance of filamentous granular sludge regulated by dissolved oxygen
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收稿日期: 2020-12-10
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Received: 2020-12-10
Improved SBR process combined with low aeration quantity was used to cultivate filamentous granular sludge. The experimental results showed that the filamentous granular sludge could be formed after 60 days of R1 operation in low aeration condition and had good settling performance. Under different aerations of the two reactors, R1 ran stably over 40 d, the removal efficiency of R1 was equivalent to that of R2(COD removal efficiency >90%, TN removal efficiency 60%-70%, TP removal efficiency 50%), saved 87.5% of aeration compared with R2. High throughput sequencing showed that the dominant strain in R1 were Tricococcus(23.0%), Thiotrix(14.9%) and Desulfobulbus (7.6%), and all of them were filamentous bacteria. It is proved that the filamentous bacteria granular sludge has the advantages of high efficiency in removing nutrients and low energy consumption, which has good application potential in the future wastewater treatment.
Keywords:
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程文静, 孙意忱, 万俊锋, 王岩.
Cheng Wenjing.
1 材料与方法
1.1 污泥接种及SBR运行
为实现反应器好氧污泥快速颗粒化,R1和R2反应器接种的污泥均来自河南新乡某淀粉厂UASB工艺内部成熟厌氧污泥〔悬浮固体浓度(MLSS)〕≈20 g/L),将污泥用自来水清洗3遍后,分别在2个反应器中加入体积约为200 mL的厌氧颗粒污泥。实验采用的反应器内径为5 cm,高度为160 cm,有效体积为2 L,运行过程中体积的交换率为35%。反应器运行温度设置为25 ℃,试验SBR装置见图 1。
图1
整个反应器的时间控制均由时控装置完成,首先通过蠕动泵从反应柱进水口进水,每次进水0.23 L,进水水质见表 1。
表1 人工模拟废水成分组成
成分 | 质量浓度/(mg·L-1) | 微量元素 | 质量浓度/(μg·L-1) | |
C6H12O6 | 0.33 | CoCl2·6H2O | 250 | |
C2H3O2K | 0.54 | CuSO4·5H2O | 250 | |
C3H5O2Na | 0.30 | MnSO4·H2O | 250 | |
(NH4)2SO4 | 0.47 | NiCl·6H2O | 250 | |
K2HPO4·7H2O | 0.022 | |||
KH2PO4 | 0.040 | |||
CaCl2 | 0.023 | |||
MgSO4·7H2O | 0.022 | |||
FeSO4·7H2O | 0.009 | |||
NaHCO3 | 0.1 |
进水营养比为COD:N:P=100:5:2(其中COD为1 000 mg/L);进水后的厌氧、好氧阶段分别采用底部微孔球形曝气头通氮气、空气实现,气体流量通过气体流量计调节控制。R1厌氧阶段氮气流量和好氧阶段空气流量分别为0和0.1 L/min;R2厌氧阶段氮气流量和好氧阶段空气流量分别为0.4 L/min和0.8 L/min,在流量计前均添加单向阀防止氮气泄漏;沉淀后的排水是由隔膜泵控制从排水口处排出,每周期排水0.69 L。
反应器的工艺安排总周期为6 h,流程为:(1)10 min进水;(2)45 min厌氧;(3)60 min好氧;(4)(1)~(3)阶段循环3次(三段进水的目的是营造低负荷环境);(5)5 min沉降;(6)10 min排水(每周期排水0.69 L)。
1.2 检测方法
本实验中的水样均采用0.45 μm滤膜过滤,于4 ℃下保存。COD采用重铬酸钾法(HJ/T 399—2007)测定;NH4+-N采用纳氏试剂分光光度法(HJ 535— 2009)测定;PO43--P采用离子色谱法测定;混合液悬浮固体浓度(MLSS)采用标准重量法测定;105 ℃时的混合液挥发性悬浮固体浓度(MLVSS)采用标准重量法测定;550 ℃时的污泥形态采用数码相机进行拍照分析。
1.3 微生物多样性(16s RNA)分析
将从反应柱提取微生物样品和冷冻(-20 ℃)保存的接种厌氧污泥样品送至上海美吉生物医药科技有限公司进行微生物多样性测序:用E. Z. N. A.Ⓡ soil试剂盒(美国Omega Bio-tek公司)提取DNA,引物采用338F(5’-ACTCCTACGGGAGGCAGCAG-3’)以及806R(5’-GGACTACHVGGGTWTCTAAT-3’),PCR扩增仪为ABI GeneAmp Ⓡ9700型。完成扩增后,回收PCR扩增产物,经纯化、洗脱、定量后根据Illumina Miseq平台(美国Illumina)构建文库并测序。原始数据上传至NCBI数据库中,并于上海美吉医药生物科技有限公司所提供的I-Sanger生信分析云平台上完成微生物多样性分析。
2 结果与讨论
2.1 污染物质的去除
R1、R2反应器运行过程中对污染物质的去除效果和反应器中生物量的浓度见图 2。
图2
由图 2可知,反应器运行初期,接种生物处在适应反应器环境的阶段,初期生物对有机物、氮和磷的去除效果较差,R1的有机物去除率为80%、总氮去除率为60%、磷的去除率为20%;R2有机物的去除率为75%、总氮去除率为37%、磷的去除率为20%。
由图 2(b)可知,R1反应柱出水NH4+-N为10 mg/L,由于R1反应柱在好氧阶段DO < 0.5 mg/L,好氧阶段的溶解氧浓度维持在较低水平,而丝状菌对氧气的捕捉能力较强,在氧浓度较低或者缺氧环境中,氨氧化菌属活性受到抑制,而丝状菌生长繁殖又需要消耗营养物质,因而最终R1反应柱对TN的去除率为60%~70%。R2反应柱运行初期出水NH4+-N为40 mg/L,这与微生物不适应环境,对营养物质的去除效果较差有关,但是随着反应柱的运行出水NH4+-N逐渐降低至10 mg/L,反应柱运行稳定后R2反应柱对TN的去除为60%~70%。
由图 2(d)可知,在2个反应器运行60 d,R1反应器形成FGS系统,R1生物量质量浓度(用MLSS表示)为4 g/L,R2生物量质量浓度为6~8 g/L,R1反应柱中生物量浓度略低于R2反应柱,这是由于在R1反应器运行过程中,有白色丝状菌流失导致的。
2.2 污泥形态
颗粒污泥的形态观察结果见图 3。
图3
颗粒污泥的SEM见图 4。
图4
图4
颗粒污泥的SEM
丝状菌颗粒污泥表面(a:×50倍,b:×2 000倍,c:×5 000倍)
好氧颗粒污泥表面(a:×110倍,b:×5 000倍,c:×1 0000倍)
2.3 微生物分析
反应器运行100 d,取R1和R2中颗粒污泥与接种污泥进行高通量测序,并对结果进行比较。考察操作分类单元(OTU)水平的venn图,结果见图 5。
图5
由图 5可知,接种物中有379种细菌的OTUs,其中只有87个OTUs(23.0%)同时出现在2个反应器的微生物样品中。与接种样本相比,分别在R1和R2中发现有263和238个新的OTUs,分别占总OTUs的50.3%和72.3%,这表明在运行过程中进化出了新物种。值得注意的是:R1和R2有237个相同的OTUs,这占了R1和R2各自总OTUs总数很大的比例(45.3%和72.0%)。这可能是因为2个反应器具有相同的进水水质,对微生物有一定的筛选作用。
门水平物种丰度见图 6。
图6
由图 6可知,接种污泥的群落主要由Pro- teobacteria(6.4%)、Chloroflexi(47.7%)、Bacteroidetes(15.7%)、Actinobacteria(10.2%)组成。在长期运行后,R1反应器中优势菌门Chloroflexi变为Proteo- bacteria,很大程度上与曝气阶段低溶解氧和三段式进水降低营养负荷条件有关。R1反应器中丝状菌的富集是导致Firmicutes菌门在R1反应器中富集的原因。与此同时,R2反应器中的优势菌门由Chloro- flexi变为Proteobacteria,很多除氮和磷菌属都与Proteobacteria有关〔17〕。而R2反应器中Bacteroidetes菌门数量的明显下降,很大程度上是与接种后水中曝气阶段的高溶解氧浓度有关。
属水平物种丰度见图 7。
图7
3 结论
丝状菌颗粒污泥能够在低溶解氧(DO < 0.5 mg/L)和低营养负荷条件下驯化成功。在反应器运行稳定阶段,FGS系统对有机物、氮、磷的去除效果与好氧颗粒污泥相当,R1和R2对有机物的去除效果都在90%以上,2个反应器对氮的去除效果为60%~70%,对磷的去除效果为50%。运行过程中通过对生物量浓度的检测发现在反应器运行过程中,R1生物量能够长期保持在一定浓度,并未因为丝状菌的生长而导致污泥大量流失。进一步考虑到R1在运行过程中好氧曝气量远低于R2曝气量,所以大大节约了系统因为曝气而消耗的能源,这一特点可以为实际污水处理工程大大节约能源,因此丝状菌颗粒污泥工艺具有很好的应用前景和潜力。
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