发光细菌法在煤化工废污水急性毒性评价中的应用

doi:10.19965/j.cnki.iwt.2021-0434

发光细菌法在煤化工废污水急性毒性评价中的应用

宋张杨^,, 韦昊, 魏玥, 孙晓懿, 孙照东, 焦瑞峰

黄河水资源保护科学研究院，河南郑州 450004

Application of bioluminescent bacteria test on evaluating toxicity of coal chemical enterprise wastewater

SONG Zhangyang^,, WEI Hao, WEI Yue, SUN Xiaoyi, SUN Zhaodong, JIAO Ruifeng

Yellow River Water Resources Protection Institution，Zhengzhou 450004，China

收稿日期: 2021-11-19

Received: 2021-11-19

作者简介 About authors

宋张杨（1986—），工程师，理学博士电话：0371-66026306，E-mail：songzhangyang1986@126.com , E-mail：songzhangyang1986@126.com

摘要

采用发光细菌法对某煤化工企业污水处理厂的进出水进行急性毒性测定。研究结果表明，该化工企业污水处理厂进水15 min和30 min的急性毒性测试结果趋于一致，进水毒性较高，高毒性污水经污水处理厂的A/O+BAF工艺处理后，出水的细菌急性毒性有较大程度降低。分析结果表明，发光细菌抑制率与COD_nb/COD存在一定关系：即废污水中不可降解化合物需氧量（COD_nb）所占废污水总化学需氧量（COD）的比例高时，细菌毒性实验的发光抑制率也高，即毒性越强。

关键词： 急性毒性 ; 发光细菌法 ; 毒性评价

Abstract

The bioluminescent bacteria test was used to evaluate the toxicity of the incoming and the treated wastewater of chemical enterprise. The results showed that the influent wastewater had high toxicity，and the 15 minutes acute toxicity test were consistent with 30 minutes. High toxicity wastewater was largely reduced by A/O（pre⁃denitrification） biochemical treatment+BAF process of wastewater treatment plant. The results showed that there was a certain relationship between luminescent bacteria inhibition rate and COD_nb/COD. It was indicated that the proportion of non⁃biodegradable chemical oxygen demand（COD_nb） of the total chemical oxygen demand（COD） was higher，when the luminescent inhibition rate was higher，and the water was more toxic.

Keywords： acute toxicity ; bioluminescent bacteria test ; toxicity evaluation

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本文引用格式

宋张杨, 韦昊, 魏玥, 孙晓懿, 孙照东, 焦瑞峰. 发光细菌法在煤化工废污水急性毒性评价中的应用. 工业水处理[J], 2022, 42(1): 158-162 doi:10.19965/j.cnki.iwt.2021-0434

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工业废水污染物种类繁多且成分复杂，不可避免存在无法处理或未降解完全的有毒成分，威胁环境和公共健康以及对污水处理厂的活性污泥体系造成致命冲击^〔1-2〕。常规监测指标测定污水中的无机污染物和有机污染物指标，不能反映污水排入水体后的综合毒性效应，而生物毒性测试可以更直接表征污水的安全性^〔3〕。2015年11月环境保护部办公厅修订的《城镇污水处理厂污染物排放标准》（征求意见稿）中也将综合毒性（稀释倍数）列入城镇污水处理厂污染物排放标准的选择控制项目。

发光细菌法是基于一种海洋发光细菌费氏弧菌Vibrio fischeri的发光活性，利用灵敏的光电检测系统测定废污水中的毒性物质对发光细菌发光强度的影响，判断毒性物质的毒性大小。因其监测步骤简单，获得结果快速而在污水、土壤、污泥、垃圾渗滤液、海洋水产品等综合毒性评价中广泛应用^〔4-8〕。

本试验以某煤化工企业污水处理厂进出水为研究对象，采用发光细菌法对其进水和出水进行毒性测定，为化工企业污水处理厂污水达标排放提供合理的评价和预警依据。

1 材料与方法

1.1 试验样品和试验条件

试验样品取自某煤化工企业污水处理厂的进水口和出水口。测试细菌：海洋发光细菌费氏弧菌（Vibrio fischeri）。所有试验操作按照ISO 11348—32007年第二版《水质—水样对费式弧菌发光抑制影响的测定第3部分：使用冻干细菌法》所规定的试验条件和试验方法进行^〔9〕。

1.2 样品采集

用棕色样品收集瓶采集样品。采集水样后瓶内应充满水样，不留空气，并用封口膜密封好，瓶外用铝箔纸包好，避光保存。毒性测定应在采样后6 h内进行，否则需要2~5 ℃下避光保存待测样品，不超过48 h。

1.3 样品预处理

对于有固体悬浮物的样品，须静置0.5~1 h或离心或过滤去除，以免干扰测定。

调节pH（手持pH计测定），所有的样品需要测量pH，样品pH需要处于6.0~8.5之间。如需调节pH，使用盐酸或氢氧化钠溶液进行调节。盐酸或氢氧化钠溶液的加入量不能超过总体积的5%（必要时可使用高浓度的溶液来减少加入体积）。

调节盐分（电导率仪测定），根据所测盐分值添加NaCl到样品中，使样品的含盐质量浓度达到20 g/L NaCl等值渗透性。对于含盐量低的样品，直接添加NaCl将其渗透性达到20 g/L NaCl。如样品中含有20~50 g/L NaCl等值物，则不需要加入盐，但最终含盐量不能超过20 g/L NaCl的渗透性。

1.4 试剂和仪器设备

费式弧菌（Vibrio fischeri）菌种冻干粉：购自中宜仪器水质毒性筛查试剂盒（发光细菌）ZYI TOX-kit Ⅳ。储存于-20 ℃。

样品稀释液：质量浓度为20 g/L的NaCl溶液，4 ℃保存。亦可作阴性质控液。

阳性参照液：试剂盒配备的ZnSO₄溶液质量浓度为1 000 mg/L，Zn²⁺质量浓度相当于227.36 mg/L，细菌50%发光抑制的Zn²⁺质量浓度为2.0 mg/L。测试中阳性质控液的配制为4.4 μL ZnSO₄母液加入495.6 μL样品稀释液混匀。

其他设备：冰箱，用于储藏菌种和试剂；金属浴温度调节模块（M500），维持测试样品在（15±1） ℃；Microtox Model 500 毒性测定仪；试管（圆形比色皿），生物发光检测仪配套的试管，与金属浴温度调节模块相适合；pH计；计时器；移液器，10 μL、100 μL、1 000 μL、5 mL；移液器配套的枪头；试管架；容量瓶；棕色样品收集瓶。

1.5 发光细菌急性毒性测定实验

费式弧菌（Vibrio fischeri）急性毒性测定实验按照以下步骤进行。

储备菌体悬浮液的制备：提前在4 ℃冷却1 mL菌体复活液（来自试剂盒附带）。从-20 ℃取出细菌冻干粉，将提前预冷的1 mL菌体复活液迅速倒入冻干细菌，轻轻晃动细菌冻干粉使其快速溶解。复苏的发光细菌悬浮液作为储备悬浮液用于检测，储存在4 ℃。

测试悬浮液的制备（参照Deltatox^® user’s manual^〔10〕中45% B-TOX毒性测试方法）：待储备菌体悬浮液混合均匀（10 min以上），吸取10 μL储备悬浮液，500 μL的细菌复苏液和渗透压调节液中，然后放入15 ℃的金属浴温度调节模块中，平衡5 min以上，用于后续测定。大批次连续试验时，可将储备菌体悬浮液按照相同菌体浓度于100 mL三角瓶中稀释定容，4 ℃储存备用。

测试温度：测定温度需要保持在（15±0.3） ℃。所有的器皿和溶液测定前1 h都需要保持在控温测试室内。

测试样品稀释系列：样品的稀释系列见表1，每个测试组别设2个平行样。

表1 样品稀释系列

Table 1 Sample dilution series

序号	测试组别	稀释水平D	样品稀释系列构成（1 000 μL）		测试悬浮液/μL
序号	测试组别	稀释水平D	样品/μL	稀释液/μL	测试悬浮液/μL
1	阴性质控组^a	2	0	1 000	1 000
2	阳性质控组^b	2	0	1 000	1 000
3	测试样组	2	1 000	0	1 000
4	测试样组	4	500	500	1 000
5	测试样组	8	250	750	1 000
6	测试样组	16	125	875	1 000
7	测试样组	32	62.5	937.5	1 000

注：a—阴性质控液为样品稀释液（20 g/L的NaCl溶液）；b—阳性质控液为ZnSO₄·7H₂O（10 mg/L），相当于2.275 mg/L Zn²⁺。

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检测步骤：Microtox Model 500毒性测定仪预热15 min，开始测定经过平衡的测试悬浮液的初始发光强度（I₀），迅速加入1 000 µL处理好的样品和质控液，摇匀测定完的试管继续放回15 ℃的加热模块中保温。分别测定反应时间为15 min（I₁₅）和30 min（I₃₀）的样品发光强度，记录所有数据。

1.6 数据处理和分析

以15 min测试结果为例，30 min的测试结果以相同方式表示。

阴性质控组：I₀为细菌的初始发光值，I_k₁₅为细菌与稀释液反应15 min后发光值，I_k₁₅/I₀为校正系数， ${\bar{f}}_{k 15}$ 为校正系数的平均值，有效性检验为均值 ${\bar{f}}_{k 15}$ 与I_k₁₅/I₀的算术差除以均值 ${\bar{f}}_{k 15}$ 来计算，平均偏差不超过3%，检测有效。

阳性质控组和样品测试组：I₀为细菌的初始发光值，I₁₅为细菌与稀释液反应15 min后发光值， $I_{c 15}$ $=$ $I_{0}$ $\times {\bar{f}}_{k 15}$ ， $H_{15}$ $=$ $(I_{c 15}$ $-$ $I_{15}) / I_{c 15}$ ， $Γ_{15}$ $=$ ${\bar{H}}_{15} / (100$ $-$ ${\bar{H}}_{15})$ ， ${\bar{H}}_{15}$ 为 $H$ ₁₅的均值。

EC₂₀和EC₅₀的计算：由已测定的样品污水所占比例c_t 和Γ_t 值，根据公式 $l g c_{t}$ $=$ $b$ $\cdot l g Γ_{t}$ $+ l g a$ ^〔9〕，可得出EC₂₀和EC₅₀，当Γ_t =0.25时对应EC₂₀时样品污水所占比例，当Γ_t =1.00时对应EC₅₀时样品污水所占比例。

2 结果与讨论

阴性质控组的测试结果见表2中1~4号， ${\bar{f}}_{k 15}$ 值在0.729~0.940之间， ${\bar{f}}_{k 30}$ 值在0.638~0.904之间， ${\bar{f}}_{k 15}$ 和 ${\bar{f}}_{k 30}$ 值均处于0.6~1.8之间，数据为有效值，且均值与平行测定值之间偏差在±0.820%与±2.430%之间，均不超过3%，检测有效。阳性质控组的测试结果见表2中5号，阳性质控液为ZnSO₄·7H₂O，质量浓度为10 mg/L，相当于2.275 mg/L 锌离子，阳性质控液接触15 min或30 min后引起的抑制作用为20%~80%，检测有效。

表2 阴性质控实验（1~4号）和阳性质控实验（5号）结果

Table 2 The results of negative control batch（No. 1 to No. 4） and positive control batch（No. 5）

批号	稀释水平D	测试值			校正系数		均值		有效性检验
批号	稀释水平D	I₀	I_k₁₅	I_k₃₀	I_k₁₅/I₀	I_k₃₀/I₀	${\bar{f}}_{k 15}$	${\bar{f}}_{k 30}$	与均值 ${\bar{f}}_{k 15}$ 的偏差/%	与均值 ${\bar{f}}_{k 30}$ 的偏差/%
1	2	101	94	93	0.931	0.921	0.940	0.904	±0.945	±1.892
1	2	97	92	86	0.948	0.887	0.940	0.904	±0.945	±1.892
2	2	101	73	66	0.723	0.653	0.729	0.638	±0.820	±2.430
2	2	98	72	61	0.735	0.622	0.729	0.638	±0.820	±2.430
3	2	90	78	71	0.867	0.789	0.859	0.780	±0.937	±1.204
3	2	87	74	67	0.851	0.770	0.859	0.780	±0.937	±1.204
4	2	95	73	66	0.768	0.695	0.752	0.684	±2.24	±1.55
4	2	98	72	66	0.735	0.673	0.752	0.684	±2.24	±1.55
		I₀	I₁₅	I₃₀	校正值		H₁₅/%	H₃₀/%	${\bar{H}}_{15}$ /%	${\bar{H}}_{30}$ /%
		I₀	I₁₅	I₃₀	I_c₁₅	I_c₃₀	H₁₅/%	H₃₀/%	${\bar{H}}_{15}$ /%	${\bar{H}}_{30}$ /%
5	2	100	37	20	93.96	90.37	60.62	77.87	61.9	78.0
5	2	101	35	20	94.90	91.27	63.12	78.09	61.9	78.0

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某煤化工企业污水处理厂进水和出水的检测结果见表3。

表3 某煤化工企业污水处理厂进水、出水毒性检测和COD、BOD₅检测

Table 3 The luminescent bacteria toxicity，COD，BOD₅ test results of the inlet and outlet water of wastewater treatment plant of coal chemical enterprise

批号	稀释水平D	测试值			I_c₁₅	I_c₃₀	${\bar{H}}_{15}$ /%	${\bar{H}}_{30}$ /%	Γ₁₅	Γ₃₀	15 min结果		30 min结果		COD/ （mg·L^-1）	BOD₅/ （mg·L^-1）
批号	稀释水平D	I₀	I₁₅	I₃₀	I_c₁₅	I_c₃₀	${\bar{H}}_{15}$ /%	${\bar{H}}_{30}$ /%	Γ₁₅	Γ₃₀	EC_20-15/%	EC_50-15/%	EC_20-30/%	EC_50-30/%	COD/ （mg·L^-1）	BOD₅/ （mg·L^-1）
1	2	96	7	4	90.20	86.75	88.8	93.0	7.90	13.26	9.83	19.20	7.76	15.05	173.0	41.60
	2	94	13	8	88.32	84.95	88.8	93.0	7.90	13.26
	4	94	26	18	88.32	84.95	62.9	73.7	1.694	2.799
	4	95	40	27	89.26	85.85	62.9	73.7	1.694	2.799
	8	95	70	61	89.26	85.85	21.7	28.0	0.278	0.389
	8	94	69	62	88.32	84.95	21.7	28.0	0.278	0.389
	16	92	77	64	86.44	83.14	12.0	21.1	0.136	0.267
	16	93	76	68	87.38	84.04	12.0	21.1	0.136	0.267
2	2	92	1	0	67.04	58.69	98.5	100	66.04	—	10.86	16.03	10.21	14.20	206.0	41.0
	2	92	1	0	67.04	58.69	98.5	100	66.04	—
	4	94	16	7	68.50	59.97	76.1	88.1	3.188	7.380
	4	90	16	7	65.59	57.42	76.1	88.1	3.188	7.380
	8	95	42	26	69.23	60.61	36.1	51.0	0.565	1.042
	8	94	46	33	68.50	59.97	36.1	51.0	0.565	1.042
	16	100	70	62	72.87	63.80	3.3	2.5	0.033 9	0.025 9
	16	93	66	58	67.77	59.33	3.3	2.5	0.033 9	0.025 9
3	2	95	98	96	81.57	74.05	-16.5	-25.7	0.142	0.205					80.0	39.10
	2	99	96	94	85.00	77.17	-16.5	-25.7	0.142	0.205
	4	89	101	97	76.42	69.38	-32.9	-41.3	0.248	0.292
	4	88	101	98	75.56	68.60	-32.9	-41.3	0.248	0.292
	8	94	100	94	80.71	73.27	-25.3	-26.9	0.202	0.212
	8	91	99	89	78.13	70.93	-25.3	-26.9	0.202	0.212
	16	85	98	93	72.98	66.26	-23.5	-27.4	0.190	0.215
	16	92	89	82	78.99	71.71	-23.5	-27.4	0.190	0.215
4	2	94	66	53	70.65	64.31	3.8	14.9	0.0390	0.176					83.0	40.8
	2	90	67	54	67.64	61.57	3.8	14.9	0.0390	0.176
	4	90	76	69	67.64	61.57	-13.9	-13.1	0.122	0.116
	4	91	79	71	68.39	62.25	-13.9	-13.1	0.122	0.116
	8	89	77	70	66.89	60.89	-11.2	-9.8	0.101	0.089 3
	8	88	71	63	66.14	60.20	-11.2	-9.8	0.101	0.089 3
	16	94	78	74	70.65	64.31	-11.1	-11.2	0.100	0.101
	16	94	79	69	70.65	64.31	-11.1	-11.2	0.100	0.101

注：批号1号、2号为污水处理厂进水样品，批号3号、4号为污水处理厂处理达标后的出水样品。

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由表3可知，1号和2号样品在15 min和30 min的测试结果趋于一致，菌群发光率损失较为稳定，进水毒性都较强，EC_20-15分别为9.83%和10.86%，EC_50-15分别为19.20%和16.03%，EC_20-30分别为7.76%和10.86%，EC_50-30分别为15.05%和14.20%。1号和2号进水样品在经过16倍以上的稀释后基本达到无毒。3号和4号出水样品在4倍稀释后抑制率H₁₅和H₃₀均呈负值，即细菌发光量出现增长现象。

R. GUERRA^〔11〕在研究工业废水中发现COD和Microtox^®细菌毒性之间存在显著的负相关。而C. V. ARAÚJO等^〔1〕研究发现，工业污水进水COD和细菌毒性的实验结果之间没有明显的相关性，而出水COD和细菌毒性实验结果有着很好的相关性。R. BOLUDA等^〔2〕在研究中发现，即样品的成分越复杂，COD与高毒性之间相关性越差。杨尚源等^〔12〕在对市政污水处理厂废水的生物抑制毒性测试中发现，废水中含有较高浓度难降解的挥发性有机物（VOC）类物质生物抑制毒性明显。黄满红等^〔13〕在对城市污水处理厂的毒性检测中也发现，发光细菌的发光抑制率与 $l n C O D_{n b}$ 之间存在正相关，水样中的难降解化学需氧量（COD_nb）的比例可能是导致细菌毒性的原因之一。本研究中，该化工企业污水处理厂同批次样品进水COD和BOD₅的浓度值见表3。

根据COD_nb的计算公式^〔13〕，COD_nb=COD-BOD₅/0.58，计算得出1号进水样品的COD_nb为101.28 mg/L，进水COD_nb/COD为58.54%；2号进水样品的COD_nb为135.31 mg/L，进水COD_nb/COD为65.68%。3号出水样品的COD_nb为12.59 mg/L，出水COD_nb/COD为15.73%；4号出水样品的COD_nb为12.66 mg/L，出水COD_nb/COD为15.25%。对比该批样品的细菌毒性结果可以发现，废污水的发光细菌抑制率与COD_nb/COD存在一定关系：1号和2号进水样品中COD_nb所占进水总的COD的比例高时，细菌毒性实验的发光抑制率也高，即毒性越强；废污水的COD_nb值低时，细菌毒性实验的发光抑制率相应低，甚至出现细菌发光量增长的现象。

废污水中的污染物经污水处理厂处理后达到排放标准后，生物毒性有较大程度的消减，毒性检测结果细菌发光的衰减量非常小，经过校正系数计算后抑制率H₁₅和H₃₀均呈负值，即细菌发光量出现增长现象（见表3中3、4号批次样品）。处理后的出水引起发光细菌发光量增加的现象，可能是出水中绝大部分污染物被降解，还存在某些营养物质适合发光细菌生长。R. BOLUDA等^〔2〕曾报道，发光细菌法检测农田收集的灌溉排水的富营养化的水时并不敏感。细菌发光量增长也有可能是出水中的某种物质引起的毒物兴奋效应（Hormesis）^〔14-15〕。Kaili SHEN等^〔15〕在研究中发现低浓度的Cu²⁺和Zn²⁺（低于1 mg/L）会明显增加细菌的发光量，本研究认为Cu²⁺和Zn²⁺本身就是细胞中一些酶活性的必须金属离子，低浓度的Cu²⁺和Zn²⁺可能会刺激细胞的酶学反应系统。对比某煤化工企业同批次样品检测数据，进出水的Cu²⁺质量浓度差异不大，为0.009 mg/L左右，而进出水的Zn²⁺质量浓度均为<0.05 mg/L，该煤化工企业废污水样品的Cu²⁺和Zn²⁺质量浓度不是造成出水发光量增加的原因，影响细菌发光量增加的因素较为复杂，需进一步深入研究。

3 结论

（1）某煤化工企业污水处理厂收集的进水具有高毒性，但经过目前运行A/O（前置反硝化）生化处理+曝气生物滤池（BAF）工艺处理后，毒性有较大程度的消减，出水无明显的综合毒性。

（2）废污水的COD_nb值高时，细菌毒性实验的发光抑制率也高，废污水的COD_nb值低时，细菌毒性实验的发光抑制率相应低，甚至出现细菌发光量增长的现象。

（3）煤化工企业废污水成分复杂，不同工艺路线产生的废污水特征污染物也各不相同，除急性毒性外，还存在慢性毒性和基因性毒性等，不同生物对毒性的耐受能力和毒素在体内的积累程度也不同。发光细菌法属于急性毒性测试，虽存在一定的局限性，但其快速、简便、高敏感性的优势可在企业污水处理厂的日常排水急性毒性的检测和污染物超标预警中发挥重要作用。

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海洋水产品中重金属检测方法的研究进展

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WANG

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， OUYANG

Lefei

， ZHANG

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Methods for detection of heavy metals in marine aquatic products

［J］. Journal of Aquaculture，2020，41（3）：5-8. doi:10.3969/j.issn.1004-2091.2020.03.001

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A²/O工艺的污泥中生物毒性物质的迁移转化特性

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Xiaoting

， MA

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， WANG

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Immigration and transformation characteristics of biotoxic substances in sludge by A²/O process

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垃圾渗滤液生物毒性检测技术的应用与展望

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， LI

Xiaotong

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，et al.

Application and outlook of biotoxicity detection technique for landfill leachate

［J］. Industrial Water Treatment，2019，39（5）：17-23. doi:10.11894/iwt.2018-0512

[本文引用: 1]

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DELtatox便携式毒性测试仪在Q-TOX和B-TOX两种模式下应用与探讨

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[本文引用: 1]

YANG

Jie

， ZHU

Zhenghong

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DELtatox portable toxicity tester application and discussion in Q⁃TOX and B⁃TOX two modes

［J］. Northern Environment，2011（8）：137-139. doi:10.3969/j.issn.1007-0370.2011.08.075

[本文引用: 1]

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GUERRA

Ecotoxicological and chemical evaluation of phenolic compounds in industrial effluents

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杨尚源，成钢，曾剑，等.

废水难生物降解与生物抑制毒性分析研究

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YANG

Shangyuan

， CHENG

Gang

， ZENG

Jian

，et al.

Study of biodegradation⁃resistant and biological inhibition toxicity sewage

［J］. Environmental Pollution and Control，2015，37（12）：51-56. doi:10.15985/j.cnki.1001-3865.2015.12.010

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黄满红，李咏梅，顾国维.

生物测试方法在城市污水毒性评价中的应用

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[本文引用: 2]

HUANG Manhong，LI Yongmei，GU Guowei，Application of several bioassays on evaluating toxicity of municipal wastewater

［J］. Journal of TongJi University（Natural Science），2005，33（11）：1489-1493. doi:10.3321/j.issn:0253-374X.2005.11.014

[本文引用: 2]

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FULLADOSA

， MURAT

J C

， BOLLINGER

J C

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Adverse effects of organic arsenical compounds towards Vibrio fischeri bacteria

［J］. Science of the Total Environment，2007，377（2/3）：207-213. doi:10.1016/j.scitotenv.2006.12.044

[本文引用: 1]

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SHEN

Kaili

， SHEN

Chaofeng

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Yuan

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Hormesis response of marine and freshwater luminescent bacteria to metal exposure

［J］. Biological Research，2009，42（2）：183-187. doi:10.4067/s0716-97602009000200006

[本文引用: 2]

The use of microtox to assess toxicity removal of industrial effluents from the industrial district of Cama?ari（BA，Brazil）

2005

... 工业废水污染物种类繁多且成分复杂，不可避免存在无法处理或未降解完全的有毒成分，威胁环境和公共健康以及对污水处理厂的活性污泥体系造成致命冲击^〔1-2〕.常规监测指标测定污水中的无机污染物和有机污染物指标，不能反映污水排入水体后的综合毒性效应，而生物毒性测试可以更直接表征污水的安全性^〔3〕.2015年11月环境保护部办公厅修订的《城镇污水处理厂污染物排放标准》（征求意见稿）中也将综合毒性（稀释倍数）列入城镇污水处理厂污染物排放标准的选择控制项目. ...

... R. GUERRA^〔11〕在研究工业废水中发现COD和Microtox^®细菌毒性之间存在显著的负相关.而C. V. ARAÚJO等^〔1〕研究发现，工业污水进水COD和细菌毒性的实验结果之间没有明显的相关性，而出水COD和细菌毒性实验结果有着很好的相关性.R. BOLUDA等^〔2〕在研究中发现，即样品的成分越复杂，COD与高毒性之间相关性越差.杨尚源等^〔12〕在对市政污水处理厂废水的生物抑制毒性测试中发现，废水中含有较高浓度难降解的挥发性有机物（VOC）类物质生物抑制毒性明显.黄满红等^〔13〕在对城市污水处理厂的毒性检测中也发现，发光细菌的发光抑制率与

l n C O D_{n b}

之间存在正相关，水样中的难降解化学需氧量（COD_nb）的比例可能是导致细菌毒性的原因之一.本研究中，该化工企业污水处理厂同批次样品进水COD和BOD₅的浓度值见表3. ...

Application of the microtox test and pollution indices to the study of water toxicity in the Albufera Natural Park（Valencia，Spain）

2002

l n C O D_{n b}

... 废污水中的污染物经污水处理厂处理后达到排放标准后，生物毒性有较大程度的消减，毒性检测结果细菌发光的衰减量非常小，经过校正系数计算后抑制率H₁₅和H₃₀均呈负值，即细菌发光量出现增长现象（见表3中3、4号批次样品）.处理后的出水引起发光细菌发光量增加的现象，可能是出水中绝大部分污染物被降解，还存在某些营养物质适合发光细菌生长.R. BOLUDA等^〔2〕曾报道，发光细菌法检测农田收集的灌溉排水的富营养化的水时并不敏感.细菌发光量增长也有可能是出水中的某种物质引起的毒物兴奋效应（Hormesis）^〔14-15〕.Kaili SHEN等^〔15〕在研究中发现低浓度的Cu²⁺和Zn²⁺（低于1 mg/L）会明显增加细菌的发光量，本研究认为Cu²⁺和Zn²⁺本身就是细胞中一些酶活性的必须金属离子，低浓度的Cu²⁺和Zn²⁺可能会刺激细胞的酶学反应系统.对比某煤化工企业同批次样品检测数据，进出水的Cu²⁺质量浓度差异不大，为0.009 mg/L左右，而进出水的Zn²⁺质量浓度均为<0.05 mg/L，该煤化工企业废污水样品的Cu²⁺和Zn²⁺质量浓度不是造成出水发光量增加的原因，影响细菌发光量增加的因素较为复杂，需进一步深入研究. ...

Validation of microtox as a first screening tool for waste classification

2014

A review on advantages of implementing luminescence inhibition test（Vibrio fischeri） for acute toxicity prediction of chemicals

2006

... 发光细菌法是基于一种海洋发光细菌费氏弧菌Vibrio fischeri的发光活性，利用灵敏的光电检测系统测定废污水中的毒性物质对发光细菌发光强度的影响，判断毒性物质的毒性大小.因其监测步骤简单，获得结果快速而在污水、土壤、污泥、垃圾渗滤液、海洋水产品等综合毒性评价中广泛应用^〔4-8〕. ...

农药生产企业浅层地下水污染物的生物毒性诊断

2020

农药生产企业浅层地下水污染物的生物毒性诊断

2020

海洋水产品中重金属检测方法的研究进展

2020

海洋水产品中重金属检测方法的研究进展

2020

A²/O工艺的污泥中生物毒性物质的迁移转化特性

2016

A²/O工艺的污泥中生物毒性物质的迁移转化特性

2016

垃圾渗滤液生物毒性检测技术的应用与展望

2019

垃圾渗滤液生物毒性检测技术的应用与展望

2019

... 试验样品取自某煤化工企业污水处理厂的进水口和出水口.测试细菌：海洋发光细菌费氏弧菌（Vibrio fischeri）.所有试验操作按照ISO 11348—32007年第二版《水质—水样对费式弧菌发光抑制影响的测定第3部分：使用冻干细菌法》所规定的试验条件和试验方法进行^〔9〕. ...

... EC₂₀和EC₅₀的计算：由已测定的样品污水所占比例c_t 和Γ_t 值，根据公式

l g c_{t}

=

b

\cdot l g Γ_{t}

+ l g a

^〔9〕，可得出EC₂₀和EC₅₀，当Γ_t =0.25时对应EC₂₀时样品污水所占比例，当Γ_t =1.00时对应EC₅₀时样品污水所占比例. ...

DELtatox便携式毒性测试仪在Q-TOX和B-TOX两种模式下应用与探讨

2011

... 测试悬浮液的制备（参照Deltatox^® user’s manual^〔10〕中45% B-TOX毒性测试方法）：待储备菌体悬浮液混合均匀（10 min以上），吸取10 μL储备悬浮液，500 μL的细菌复苏液和渗透压调节液中，然后放入15 ℃的金属浴温度调节模块中，平衡5 min以上，用于后续测定.大批次连续试验时，可将储备菌体悬浮液按照相同菌体浓度于100 mL三角瓶中稀释定容，4 ℃储存备用. ...

DELtatox便携式毒性测试仪在Q-TOX和B-TOX两种模式下应用与探讨

2011

Ecotoxicological and chemical evaluation of phenolic compounds in industrial effluents

2001

l n C O D_{n b}

废水难生物降解与生物抑制毒性分析研究

2015

l n C O D_{n b}

废水难生物降解与生物抑制毒性分析研究

2015

l n C O D_{n b}

生物测试方法在城市污水毒性评价中的应用

2005

l n C O D_{n b}

... 根据COD_nb的计算公式^〔13〕，COD_nb=COD-BOD₅/0.58，计算得出1号进水样品的COD_nb为101.28 mg/L，进水COD_nb/COD为58.54%；2号进水样品的COD_nb为135.31 mg/L，进水COD_nb/COD为65.68%.3号出水样品的COD_nb为12.59 mg/L，出水COD_nb/COD为15.73%；4号出水样品的COD_nb为12.66 mg/L，出水COD_nb/COD为15.25%.对比该批样品的细菌毒性结果可以发现，废污水的发光细菌抑制率与COD_nb/COD存在一定关系：1号和2号进水样品中COD_nb所占进水总的COD的比例高时，细菌毒性实验的发光抑制率也高，即毒性越强；废污水的COD_nb值低时，细菌毒性实验的发光抑制率相应低，甚至出现细菌发光量增长的现象. ...

生物测试方法在城市污水毒性评价中的应用

2005

l n C O D_{n b}

Adverse effects of organic arsenical compounds towards Vibrio fischeri bacteria

2007

Hormesis response of marine and freshwater luminescent bacteria to metal exposure

2009

... 〔15〕在研究中发现低浓度的Cu²⁺和Zn²⁺（低于1 mg/L）会明显增加细菌的发光量，本研究认为Cu²⁺和Zn²⁺本身就是细胞中一些酶活性的必须金属离子，低浓度的Cu²⁺和Zn²⁺可能会刺激细胞的酶学反应系统.对比某煤化工企业同批次样品检测数据，进出水的Cu²⁺质量浓度差异不大，为0.009 mg/L左右，而进出水的Zn²⁺质量浓度均为<0.05 mg/L，该煤化工企业废污水样品的Cu²⁺和Zn²⁺质量浓度不是造成出水发光量增加的原因，影响细菌发光量增加的因素较为复杂，需进一步深入研究. ...

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